期刊简介
中华医学会主办，四川大学承办。本刊以报道我国医学遗传学、人类遗传学和相关领域的基础理论、技术方法等最新研究成果；以从事医学遗传学工作的各科临床医生、计划生育工作者、大专院校和科研单位有关人员为主要读者对象。设有述评、论著、技术与方法、综述、调查报告、遗传咨询、临床细胞遗传学、病例报告等栏目。 从1998年以来被美国《医学索引》（IM）、《化学文摘》（CA）、《工程索引》（EI）、ISI数据库的Biological Abstracts及BIOSIS Previews，波兰《哥白尼索引》（IC）,荷兰《医学文摘》（EM）和俄罗斯《文摘杂志》（AJ）等国际著名检索系统收录。
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首页>中华医学遗传学杂志
- 杂志名称：中华医学遗传学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1003-9406
- 国内刊号：51-1374/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：2000年获四川省优秀期刊一等奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 文摘杂志, 哥白尼索引(波兰), 医学文摘, CA 化学文摘(美)
靶向人端粒酶逆转录酶基因小片段干涉RNA慢病毒表达载体的构建与鉴定
赵鹏；傅震；尤永平；王存祖；陈云祥；陆小明；鲁艾林；刘宁
关键词：慢病毒, 人端粒酶逆转录酶基因, RNA干涉
摘要：目的 通过构建靶向人端粒酶催化亚基人端粒酶逆转录酶基因(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)RNA干涉(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为进一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础.方法 根据hTERT设计的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链插入到pLVTHM质粒,生成含RNAi盒的载体,然后与pCMV-dR8.74和pMD2G病毒包装所必须的元件经脂质体导入T293细胞,包装成慢病毒,收集上清浓缩病毒并检测其滴度.所得病毒感染U87胶质瘤细胞,逆转录PCR和端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)检测干扰后细胞内hTERT表达变化及端粒酶表达变化,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功;成功包装成高滴度的慢病毒.逆转录PCR和TRAP检测结果证实构建的hTERT-小片段干涉RNA(small interference RNA,siRNA)慢病毒表达载体可显著抑制hTERT基因的表达和端粒酶活性并导致细胞凋亡.结论 成功构建了携带靶向hTERT基因的RNAi慢病毒载体.该载体能够有效抑制hTERT的表达和端粒酶活性并导致细胞凋亡,为以hTERT为靶点的胶质瘤基因治疗的后续研究奠定基础.
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